Zwyrodnienie dysku lędźwiowego jest związane z wariantem węglowodanowej sulfotransferazy 3 ad 6

Spekulujemy, że łagodna redukcja CHST3 spowodowana podatnością na SNP może spowodować degenerację krążka u dorosłych w połączeniu z innymi czynnikami ryzyka. Niedawna publikacja wykazała, że miRNA prawdopodobnie biorą udział w degeneracyjnym procesie IVD, z kilkoma podwyższonymi lub obniżonymi poziomami w komórkach izolowanych ze zdegenerowanych tkanek (38). Chociaż miR-513a-5p nie znajdował się wśród zgłoszonych miRNA o zmienionych poziomach ekspresji (38), stwierdziliśmy, że wchodzi on w interakcje z pewnymi allelami CHST3, zmniejszając jego ekspresję. miR-513a-5p ma również negatywny wpływ na poziom mRNA B7-H1 (znany również jako CD274 lub zaprogramowany receptor śmierci [PD-1] ligand-1) w komórkach nabłonka żółciowego (cholangiocyty) (39). B7-H1 jest kluczowym członkiem rodziny kostymulatorów B7 o ważnych funkcjach regulatorowych w komórkowej odpowiedzi immunologicznej (40). miR-513a-5p wiąże się z miejscem w B7-H1 3-UTR, powodując represję translacyjną (39). Ekspresja samego miR-513a-5p może być obniżona przez IFN-y (39), prozapalną cytokinę, która może pośredniczyć w wielu zdarzeniach komórkowych w cholangiocytach (41). Możliwe jest zatem dynamiczne oddziaływanie między miR-513a-5p i innymi miRNA, regulowanymi przez prozapalne cytokiny w procesie degeneracyjnym, których nie można łatwo wychwycić w próbkach tkanki krążkowej. Ekspresję miR-513a-5p w odpowiedzi na różne cytokiny należy dokładnie zbadać w komórkach tarczowych lub eksplantach IVD w bioreaktorach. Podsumowując, niniejsze badanie stanowi największe systematyczne badanie dotychczas genetycznych czynników ryzyka dla LDD. Korzystając z kombinacji analizy powiązań w całym genomie i badań asocjacyjnych, zidentyfikowaliśmy CHST3 jako nowy czynnik ryzyka, podkreślając znaczenie CHST3 jako genu choroby układu mięśniowo-szkieletowego oraz zaangażowanie miRNA, rzucając światło na molekularną patogenezę LDD. Metody Badane populacje. Studia asocjacyjne z kontrolą przypadku przeprowadzono przy użyciu wielu kohort z 3 różnych populacji składających się z pacjentów chińskich, japońskich i fińskich (patrz Tabela uzupełniająca dla kryteriów dotyczących składu i fenotypu włączenia). Wszyscy rekrutowani osobnicy z południowo chińskiej kohorty przeszli badanie MRI odcinka lędźwiowego kręgosłupa. LDD rozpoznano na podstawie zmian natężenia sygnału w NP punktów IVD odcinka lędźwiowego kręgosłupa i oceniano za pomocą klasyfikacji Schneidermana (42) dla natężenia sygnału w NP (43). Ponieważ wiek jest czynnikiem zakłócającym LDD, dostosowaliśmy się do tego za pomocą metody okna przesuwnego (20, 27). W skrócie, wynik LDD oparty na podsumowaniu wyniku Schneidermana w obszarze lędźwiowym został znormalizowany przez transformację logarytmiczną. Pasma wiekowa dla każdej osoby została zdefiniowana jako wiek. 5 lat. Skorygowany względem wieku wskaźnik LDD dla każdej osoby obliczono odejmując średnią, a następnie dzieląc przez SD w indywidualnym przedziale wiekowym. Kohorty NC, J1, J2, J3, F1 (27) i F3 (23) rekrutowano na podstawie LDH charakteryzującej się rwa kulszową lub LBP wymagającą leczenia chirurgicznego, ale niekoniecznie poddawano leczeniu chirurgicznemu. Kohorta F2 (28) składała się z osób z kohorty urodzenia Północnej Finlandii 1966 (NFBC 66), hospitalizowanych z powodu rwy kulszowej. 18 rodzin z wczesnym początkiem LDD zidentyfikowanych na podstawie rekrutacji kohorty południowo chińskiej wykorzystano do analizy sprzężeń całego genomu (Supplemental Figure 1). Szczegółowe informacje o zestawach próbek znajdują się w Dodatkowych metodach. Metody laboratoryjne. Do analizy sprzężeń użyto zestawu mapowania ludzkiego PRISM v2.5-MD10 (Applied Biosystems). Illumina HumanHap550v3 Genotypowanie BeadChip zastosowano w pierwszym etapie GWAS. Do genotypowania określonych SNP stosowano wiele metod, w zależności od pochodzenia kohorty (patrz Metody dodatkowe). Ilościową ocenę ekspresji genów przeprowadzono za pomocą ilościowego RT-PCR na całkowitym RNA wyekstrahowanym z tkanek tarcz zebranych pooperacyjnie za świadomą zgodą, natomiast pirosekwencjonowanie zastosowano do określenia względnych allelowych produktów mRNA. Ekspresję specyficznego miRNA określono przy użyciu testów miRNA TaqMan (Applied Biosystems). Prognozowanie wiązania miRNA wariantów SNP przeprowadzono za pomocą bazy danych PolymiRTS (30). Testy lucyferazy przeprowadzono w transfekowanych chondrocytach C28I2 (dostarczonych przez MB Goldring, Hospital for Special Surgery, New York, New York, USA). Szczegółowe informacje na temat analiz ekspresji genów i miRNA, generowania konstruktów reporterów, transfekcji komórek, warunków badania lucyferazy i sekwencji starterów można znaleźć w Dodatkowych metodach i dodatkowej Tabeli 4. Statystyka. Wielopunktową analizę NPL (44) przeprowadzono przy użyciu funkcji oceny Salla MERLIN (45); Podaje się wartości N-score Z i odpowiadające wartości P
[patrz też: gimnastyka korekcyjna zestaw ćwiczeń, rozgrzewka przed ćwiczeniami, hemoroidy leki bez recepty ]
[patrz też: koktajl z natki pietruszki, hemoroidy leki bez recepty, ostre zapalenie migdałków ]