Zmieniono rozwój łożyska i wewnątrzmaciczne ograniczenie wzrostu u myszy transgenicznych wiążących IGF białko-1 czesc 4

Wzrost płodu w e11.5 jest zaburzony u transgenicznych matek. Ograniczenie wzrostu jest niezależne od genotypu płodu, co sugeruje, że jest ono wtórne do niewydolności łożyska / osobnika. Wzrost płodu był podobny w obydwu środowiskach macicy w e14.5 i e17.5. Nadmiar matczynego IGFBP-1 miał trwały wpływ na wzrost łożyska. Średnie masy łożyskowe były większe u samic transgenicznych we wszystkich punktach czasowych, niezależnie od genotypu płodu. Tabela 2 Skutki nadekspresji pojedynczego hIGFBP-1: wzrost płodu i macicy u transgenicznych w porównaniu do matek typu dzikiego Wpływ na żywotność płodów miał genotyp rodzicielski. W przypadku krycia F. / M + nie zaobserwowano zgonów płodów w ponad 100 koncepcjach z łącznie 12 miotów. Natomiast w przypadku krycia z udziałem transgenicznej samicy wskaźnik śmierci płodu wynosił 12%. Ekspresja łożyskowego IGF-II. Ekspresję łożyskowego IGF-II zbadano za pomocą analizy Northern blot przy użyciu pełnej długości mysiej sondy cDNA (Figura 5). Nie stwierdzono istotnej różnicy między poziomami ekspresji u myszy transgenicznych i dzikich hIGFBP-1 przy e11,5 lub e14.5. Figura 5 Analiza Northern blot ekspresji łożyskowego IGF-II. Całkowity RNA z e11.5 i e14.5 placentas z samic typu dzikiego (F. / M +) i transgenicznych (F + / M.) Badano za pomocą pełnej długości cDNA mysiego IGF-II. Błony usunięto i powtórnie monitorowano mysim cDNA GAPDH, aby zweryfikować równe ładowanie próbki. Histologia łożyska. Porównanie morfologii łożyska i histologii wskazuje na różnice w inwazji trofoblastów i różnicowaniu u myszy transgenicznych (Figura 6). Decydujący składnik łożysk z samic typu dzikiego był większy niż łożysk z transgenicznych samic. Placentas od F + / M. Krycia również miały dowody na nienormalne różnicowanie się trofoblastu. Strefa połączenia była większa w łożyskach transgenicznych samic niż w łożyskach z samic typu dzikiego, a stosunek gąbczrofoblastów do komórek glikogenu był wyższy u transgenicznych samic. Najbardziej uderzającą różnicą w strukturze łożyska była wielkość strefy labiryntu. To było znacznie powiększone u transgenicznych samic, zajmując około 80% powierzchni przekroju poprzecznego łożyska w porównaniu z około 50% w łożyskach z samic typu dzikiego. Figura 6 Histologia śródbytnicza u myszy transgenicznych hIGFBP-1. (a) Morfologia brutto. Pokazano różne warstwy funkcjonalne mysiego łożyska (d, desek, j, połączenie, l, labirynt). Różnice w powierzchni przekroju łożyska i względne proporcje różnych warstw funkcjonalnych łożyska są wyraźnie widoczne. (b) Grubość pojedyncza. Grubość warstwy doczesnej jest większa w łożyskach z samic typu dzikiego, co wskazuje na zmniejszoną inwazję trofoblastów u transgenicznych samic. Strefa labiryntu jest znacznie powiększona, zajmując około 80% powierzchni przekroju poprzecznego łożyska w porównaniu z około 50% w łożyskach typu dzikiego. sp, spongiotrofoblast; mv, matczyne naczynie krwionośne; gc, komórki glikogenu; gt, gigantyczne komórki trofoblastu. (c) Trofoblasty w strefie junctional. Strefa połączenia jest większa w łożyskach transgenicznych samic. Istnieje podobna liczba komórek glikogenu i gąbczrofoblastów w łożyskach z samic typu dzikiego. W myszach transgenicznych gąbczrofoblasty są dominującym typem komórek; Komórki glikogenu są stosunkowo rzadkie w porównaniu z łożyskami z samic typu dzikiego. Dyskusja W tym badaniu określiliśmy wpływ endogennej płodowej i matczynej nadekspresji IGFBP-1 na wzrost łożyska i płodu u myszy transgenicznych. Opracowano wiele innych transgenicznych modeli nadekspresji IGFBP-1, z których dwa opisywały nieprawidłowości w rozwoju płodowym i rozwojowym. Gay i wsp. zastosował ludzki promotor p-1 -antytrypsyny do ukierunkowania ekspresji IGFBP-1 na wątrobę (15), podczas gdy Rajkumar i jego współpracownicy użyli promotora mysiej kinazy fosfoglicerynianowej (pgk) do kierowania ekspresją szczurzego genu strukturalnego IGFBP-1 (16). Badacze ci zgłosili zmniejszoną płodność i rozmiar miotu oraz zwiększoną śmiertelność ante i poporodową. Jest bardzo mało prawdopodobne, aby te efekty były spowodowane zaburzeniami endometrium lub łożyska, ponieważ żaden z promotorów nie jest aktywny w tych tkankach. W drugim modelu autorzy wyciągnęli wniosek, że ekspresja transgenu w tkankach matczynych nie ma znaczącego negatywnego wpływu na implantację. Biorąc pod uwagę ograniczenia tych modeli do badania funkcji IGFBP-1 w łożysku, podjęliśmy niniejsze badanie z użyciem myszy transgenicznych o ukierunkowanej nadekspresji IGFBP-1 w endometrium. Osiągnięto to przy użyciu ludzkiego genu strukturalnego IGFBP-1 i jego natywnego promotora jako konstruktu do generowania myszy transgenicznych
[patrz też: koktajl z natki pietruszki, sympozjum diabetologiczne zakopane 2015, poradnia laryngologiczna olsztyn ]
[więcej w: poradnia laryngologiczna olsztyn, ergonomia stanowiska pracy biurowej, ile kalorii ma chleb żytni ]