Rola CD44 w wywołanym antygenem mysim modelu eozynofilii płucnej

Wcześniejsze badania wykazały, że komórki T CD4 + wytwarzające IL-5. odgrywają kluczową rolę w alergicznym zapaleniu dróg oddechowych. Doniesiono również, że komórki T CD4 + wykazują wyższe poziomy CD44 w drogach oddechowych niż we krwi obwodowej pacjentów z alergicznymi chorobami układu oddechowego. Wykorzystaliśmy doświadczalne eozynofile płucne indukowane u myszy przez ekstrakt Ascaris suum (Asc) w celu zbadania roli CD44 w rozwoju alergicznego zapalenia dróg oddechowych. Dootrzewnowe podanie mAb anty-CD44 zapobiegało gromadzeniu się limfocytów i eozynofili w płucach. MAb anty-CD44 blokowało również indukowane przez antygen podwyższenie poziomu cytokin Th2, jak również chemokin (CCL11, CCL17) w płynie do płukania oskrzelowo-pęcherzykowego (BALF). Leczenie mAb anty-CD44 hamowało podwyższone poziomy kwasu hialuronowego (HA) i stężenia leukotrienów w BALF, które zazwyczaj wynikają z prowokacji antygenem. MAb anty-CD44 blokowało także nadreaktywność dróg oddechowych indukowaną przez antygen. MAb anty-CD44 (IM7) zahamowało zdolność wiązania splenocytów HA z obniżonymi poziomami CD44. Poziom rozpuszczalnego CD44 w surowicy był zwiększony u myszy leczonych IMcp, którym podawano Asc, ale nie u myszy leczonych KM201, w porównaniu z myszami traktowanymi szczurem IgGa, którym podawano Asc. Ab. S, które blokują wiązanie CD44-HA zmniejszając alergiczne zapalenie dróg oddechowych poprzez zapobieganie akumulacji limfocytów i eozynofili w płucach. Tak więc CD44 może być krytyczny dla rozwoju alergicznego zapalenia dróg oddechowych. Wprowadzenie CD44 jest szeroko eksprymowaną komórkową cząsteczką adhezyjną, która uczestniczy w adhezji limfocytów do śródbłonka zapalnego, hematopoezie, przerzutach nowotworowych i wielu innych procesach (1). Postulowano, że głównym ligandem dla CD44 jest kwas hialuronowy (HA) (2). Interakcje CD44-HA mogą sprzyjać wynaczynieniu i wyprowadzeniu limfocytów aktywowanych antygenem na zapalenie łożysk naczyniowych. Ta interakcja obejmuje zwijanie leukocytów przez komórki śródbłonka (3, 4). Ponadto, zwiększoną ekspresję HA wykazano na komórkach śródbłonka mikronaczyniowego w odpowiedzi na bodźce prozapalne, takie jak TNF-a, IL-1 (3 i LPS in vitro (5). Rola CD44 w regulacji stanu zapalnego in vivo została wykazana w badaniach, w których leczenie anty-CD44 hamowało rozwój wywołanego kolagenem zapalenia stawów (6, 7), wywołanego eksperymentalnie zapalenia okrężnicy (8), jak również optymalnego typu opóźnionego reakcje nadwrażliwości (9). Uważa się, że rekrutacja komórek T CD4 + aktywowanych antygenem i eozynofili do dróg oddechowych przyczynia się do patogenezy alergicznego zapalenia dróg oddechowych, takiego jak astma oskrzelowa (10). Komórki T CD4 + eksprymujące wysokie poziomy CD44 nagromadzone w płucach po podaniu antygenu w mysim modelu astmy (11). Eozynofile w płucach wykazywały wyższy poziom CD44 w porównaniu z eozynofilami we krwi obwodowej u pacjentów z eozynofilowym zapaleniem płuc (EP) (12). Ponadto zdolność wiązania CD44 komórek T CD4 + i eozynofilów w płynie z popłuczyn oskrzelowo-pęcherzykowych (BALF) była wyższa niż w komórkach krwi obwodowej u pacjentów z EP (nasze niepublikowane obserwacje). Wreszcie, eozynofile mogą być aktywowane przez HA za pośrednictwem sygnalizacji CD44 (13). Obecnie używamy mysiego modelu alergicznego zapalenia dróg oddechowych indukowanego przez przezskórne podawanie antygenów pasożytów jelitowych i roztoczy i dwóch mAb anty-CD44 w celu oceny roli CD44 w tych odpowiedziach poprzez analizę BALF i nadreaktywności dróg oddechowych. MAb KM201, którego epitop znajduje się w miejscu wiążącym ligand, bezpośrednio blokuje wiązanie HA z CD44 (14), a mAb IM7 indukuje zasadnicze zrzucenie receptora z powierzchni komórki (9). Wnioskujemy, że CD44 jest mechanicznie zaangażowany w alergiczne reakcje oddechowe i może stanowić cel terapeutyczny. Metody Zwierzęta. Myszy C57BL / 6 (w wieku 8-12 tygodni) otrzymano od CLEA Japan Inc. (Tokio, Japonia). Wszystkie zwierzęta doświadczalne użyte w tym badaniu były objęte protokołem zatwierdzonym przez Institutional Animal Care and Use Committee w Miyazaki Medical College. Ekstrakt z pasożyta. Liofilizowane dorosłe samice preparaty Ascaris suum (Asc) zostały dostarczone przez Yukifumi Nawa (Miyazaki Medical College, Miyazaki, Japonia). Homogenizowano je w PBS i wirowano przy 100 000 g przez 20 min w 4 ° C. Supernatanty zebrano i dostosowano do stężenia białka 5 mg / ml dla uczulenia przeznosowego. Wyzwanie antygenowe i BAL. Uczulenie węchowe przeprowadzono zgodnie z procedurą opisaną uprzednio przez Nogami i in. (15), z niewielkimi modyfikacjami. Myszy znieczulono eterem dietylowym i 200 .g roztworu Asc stosowano donosowo. Procedury powtarzano przez 2 kolejne dni w tygodniu przez 2 tygodnie
[więcej w: sympozjum diabetologiczne zakopane 2015, polskie towarzystwo diabetologiczne, rozgrzewka przed ćwiczeniami ]
[hasła pokrewne: ostre zapalenie migdałków, młody jęczmień a odchudzanie forum, poradnia laryngologiczna olsztyn ]