Rola CD44 w wywołanym antygenem mysim modelu eozynofilii płucnej ad 5

MAb anty-CD44 nie wpłynęły na ekspresję i zdolność wiązania CD-CD44 na makrofagach pęcherzykowych w BALF myszy traktowanych Asc. Zbadano również wpływ mAb anty-CD44 na rozpuszczalne poziomy CD44 w surowicy i BALF myszy traktowanych Asc. Co interesujące, poziomy rozpuszczalnego CD44 w osoczu były zwiększone u myszy leczonych IMc z prowokacją Imc (Asc / IM7), ale nie u myszy leczonych KM201 (Asc / KM201), w porównaniu z myszami traktowanymi RIgG prowokowanymi Asc (Asc / RIgG) . MAb anty-CD44 nie wpływały na rozpuszczalne poziomy CD44 w BALF myszy traktowanych Asc (Figura 7). Hamujący wpływ mAb anty-CD44, IM-7, na migrację leukocytów do tkanki płucnej objętej procesem zapalnym może być spowodowany zrzuceniem CD44 na powierzchnię komórki, jak również zmniejszeniem zdolności do wiązania leukocytów przez HA. Figura 6 Ekspresja i zdolność wiązania CD45 CD44 na komórkach śledziony i makrofagach pęcherzykowych u myszy eksponowanych na Asc traktowanych mAb anty-CD44. Ekspresję i zdolność wiązania CD45 CD44 na komórkach śledziony (a) i makrofagach pęcherzykowych (b) oceniano na myszach 24 godziny po prowokacji alergenem, jak opisano w Metodach. Dane reprezentują średnią. SEM procent komórek dodatnich w porównaniu z kontrolą ujemną w analizie przepływowej. Przedstawione wartości są uśrednione z trzech do pięciu niezależnych eksperymentów. * Znaczące różnice (P <0,05) między myszami leczonymi mAb anty-CD44 prowokowanymi Asc (Asc / KM201 lub Asc / IM7) i myszami traktującymi RIgG prowokowanymi Asc (Asc / RIgG). Figura 7 Rozpuszczalny CD44 (sCD44) w surowicy i BALF. Ilości sCD44 w surowicy i BALF mierzono za pomocą ELISA, jak opisano w Metodach. Dane reprezentują średnią. SEM. Przedstawione wartości są uśrednione z pięciu niezależnych eksperymentów. * Znaczące różnice (P <0,05) między myszami leczonymi mAb anty-CD44 prowokowanymi Asc (Asc / KM201 lub Asc / IM7) i myszami traktującymi RIgG prowokowanymi Asc (Asc / RIgG). Anty-CD44 mAb hamuje nie tylko akumulację eozynofilów i limfocytów, ale także nadreaktywność dróg oddechowych u myszy leczonych alergenem roztoczy. Antygen roztoczy jest powszechnym alergenem na astmę oskrzelową człowieka, a antygen Asc nie jest typowym antygenem alergicznego zapalenia dróg oddechowych. W związku z tym zbadaliśmy wpływ mAb anty-CD44 (IM7) na indukowane przez Der alergiczne zapalenie dróg oddechowych myszy. Dwie grupy myszy uczulano za pomocą Der w PBS lub PBS, zgodnie z procedurami opisanymi w Methods. BAL przeprowadzono 24 godziny po ostatnim prowokacji antygenem. Po ekspozycji na Der całkowita liczba leukocytów, makrofagów, limfocytów i granulocytów kwasochłonnych była istotnie zwiększona w BALF w porównaniu z myszami eksponowanymi na PBS. Podawanie mAb anty-CD44 (IM7) w ciągu 12 godzin przed ostatnim testem prowokacji Der znacząco zmniejszyło liczbę limfocytów i eozynofilów (P <0,05) (Figura 8a). Oporność dróg oddechowych oceniano również 24 godziny po ostatnim badaniu Der. W grupie Der zaobserwowano nadreaktywność dróg oddechowych po prowokacji aerozolem metacholiny (25 i 50 mg / ml), ze znaczącym wzrostem oporu dróg oddechowych w porównaniu z grupą PBS (Figura 8b, P <0,05; Der / RIgG versus PBS). MAb anty-CD44 (IM7) znacząco zmniejszało nadreaktywność dróg oddechowych do aerozolizowanej metacholiny u myszy leczonych Der w porównaniu z RIgG (Figura 8b, P <0,05, Der / IM7 versus Der / RIgG). Figura 8 mAb Anti-CD44 hamuje wywołane alergenem roztocza zapalenie dróg oddechowych i nadreaktywność dróg oddechowych. Liczbę komórek zapalnych w BALF (a) i reakcję dróg oddechowych na metacholinę w aerozolu (b) określono 24 godziny po prowokacji alergenem roztoczy, jak opisano w Metodach. Dane reprezentują średnią. SEM. Przedstawione wartości są uśrednione z pięciu niezależnych eksperymentów. # Znaczące różnice (P <0,05) między myszami leczonymi alergenem (Der) RIgG (Der / RIgG) i myszami prowokowanymi PBS (PBS). * Znaczące różnice (P <0,05) między myszami leczonymi mAb anty-CD44 eksprymowanymi Der (Der / IM7) i myszami traktowanymi RIgG prowokowanymi Der (Der / RIgG). Dyskusja Udokumentowano skuteczność przedkliniczną inhibitorów CD44 w kilku modelach zapalnych, w tym alergicznym kontaktowym zapaleniu skóry (9) i wywołanym kolagenem zapaleniu stawów (6, 7). Tutaj badaliśmy efekty leczenia anty-CD44 w mysim modelu wywołanego alergenem zapalenia dróg oddechowych. Wstrzyknięcie anty-CD44 znacznie zapobiegało infiltracji eozynofili i limfocytów do dróg oddechowych bez zmiany liczby eozynofilów w szpiku kostnym. Anty-CD44 hamował eozynofilowe zapalenie płuc, związane z obniżonym poziomem cytokin Th2, IL-4 i IL-5, a także chemokinami eotaksyną i TARC. Ponadto wzrost stężenia HA i leukotrienów w BALF został stłumiony przez leczenie anty-CD44 [więcej w: koktajl z natki pietruszki, młody jęczmień a odchudzanie forum, brak szczęścia w miłości ] [patrz też: polskie towarzystwo diabetologiczne, identyfikator uczestnika zjazdu, zjazd ptd 2015 ]