Receptor estrogenu jest głównym mediatorem wpływu ochronnego antygenu 17 -radestiol na wielkość uszkodzenia w Apoe / myszy ad

Stwierdziliśmy, że miażdżyca zapewniana przez podawanie E2 jest zasadniczo zniesiona u myszy Aee, które nie mają ER (3, ale miażdżycę tętnic przez inne niż ER. mechanizmy są nadal wyraźnie widoczne. Metody Eksperymenty z myszami przeprowadzono zgodnie z protokołami zatwierdzonymi przez Institutional Animal Care and Use Committee z University of North Carolina w Chapel Hill. Generowanie i stosowanie myszy AAee i ee. Myszy heterozygotyczne pod względem mutacji insercyjnej w ER. (A.) I Apoe. /. myszy (ee), każda krzyżowana wstecznie ponad 99% z C57BL6 / J, były krzyżowane w celu uzyskania samców i samic heterozygotycznych pod względem obu mutacji (A (Ee). Te podwójne heterozygoty zostały następnie połączone z ee myszy, aby wytworzyć myszy heterozygotyczne wobec ER. i homozygotyczne pod względem insercyjnej mutacji w ApoE (Aeeee). Intercrossing myszy A. Ee produkowały myszy pozbawione ER. (ee) i kontrolki z miotu z nietkniętymi ER. (AAee). W dniu 30 zważono samice, wycięto jajniki i losowo wszczepiono podskórnie peletkami zaprojektowanymi do uwalniania E2 przy 6 ug / dzień przez 60 dni lub kontrolą placebo (C) (Innovative Research of America, Sarasota, Floryda, USA). Cztery badane grupy były AAee z E2 (AAee / E2; n = 17), w przypadku E2 (AEe / E2; n = 14) i ich odpowiednimi grupami kontrolnymi (AAee / C; n = 17 i. ee / C; n = 11). Peletki zastąpiono 60 dni po operacji, a myszy uśmiercano 30 dni później (dzień 120 lub 4 miesiące) po 2- do 4-godzinnym poście. Rejestrowano całkowitą masę ciała i masę macicy. Cztery z 17 myszy AAee / E2 zmarły podczas trzeciego miesiąca leczenia, a dane z kolejnych czterech myszy zostały wykluczone z innych powodów (patrz Wyniki), pozostawiając 9 myszy AAee / E2. Myszy utrzymywano w warunkach wolnych od specyficznych patogenów na standardowej karmie dla myszy (Prolab Isopro RMH 3000, PMI Nutrition International, Brentwood, Missouri, USA). Stężenie E2 w surowicy. Poziomy E2 badano na osoczu od pojedynczych myszy otrzymanych po uśmierceniu przy użyciu zestawu testów radioimmunologicznych dla E2 i postępując zgodnie z instrukcjami producenta (Diagnostic Systems Laboratories Inc., Webster, Texas, USA). Analiza zmian miażdżycowych. Serca perfuzyjnie utrwalono 4% paraformaldehydem pod ciśnieniem fizjologicznym (pH 7,4). Bliższą aortę i część serca zawierającą korzeń aorty usunięto, zatopiono, podzielono i zabarwiono hematoksyliną i eozyną (H & E) i Sudanem IV (Fisher Scientific, Fair Lawn, New Jersey, USA), jak opisano (38). Rozmiar zmiany mierzono za pomocą oprogramowania obrazowania NIH 1.59 z czterech sekcji wybranych według ścisłych kryteriów anatomicznych. Średnia z czterech sekcji została przyjęta jako wielkość zmiany każdego zwierzęcia i przekształcona logarytmicznie dla analiz statystycznych. Płytki w zatoce aortalnej zostały niedokładnie ocenione przez RL Reddick a, doświadczonego patologa sercowo-naczyniowego, ze względu na złożoność uszkodzenia, wykorzystując jako parametry brak lub obecność komórek piankowatych, w pełni ukształtowaną lub rozwijającą się włóknistą nasadkę, zwapnienia, rozpad cholesterolu, rdzenie bezkomórkowe, komórki zapalne i przyśrodkowe rozszerzenia. Analiza lipidów w osoczu. Całkowity cholesterol, HDL i triglicerydy mierzono kolorymetrycznie (Sigma-Aldrich, Milwaukee, Wisconsin, USA) na osoczu zbieranym podczas ofiary. Poziom cholesterolu HDL oznaczono po wytrąceniu cząstek zawierających apoB. Próbki osocza przechowywano w. 20 ° C do czasu oznaczenia. Statystyka. Analizy statystyczne przeprowadzono przy użyciu pakietu oprogramowania komputerowego SYSTAT 5.0 (SPSS, Chicago, Illinois, USA), JMP (SAS Institute Inc., Cary, North Carolina, USA) i LogXact 2.0 (Cytel Corp., Cambridge, Massachusetts, USA). USA). Dane analizowano przy pomocy czynnikowej ANOVA, stosując genotyp (AAee versus. Ee) i status E2 (E2 versus C) jako dwie zmienne grupujące. Dalsze analizy mające na celu zinterpretowanie istotnych głównych efektów i / lub interakcji zostały przeprowadzone przy użyciu procedury porównywania wielu punktów odniesienia Tukey-Kramer. Nieparametryczne analizy zmian histopatologicznych zostały przeprowadzone przy wielokrotnej regresji logistycznej. Porównanie samic z E2 versus C dla każdego genotypu było z dokładnym testem Fishera z zastosowaniem procedury Bonferoniego w celu skorygowania wielokrotnych porównań. Korelacje między różnymi parametrami analizowano za pomocą prostej regresji liniowej. Wartości P mniejsze niż 0,05 uznano za statystycznie istotne dla wszystkich porównań. Wyniki Projekt eksperymentalny. Zwierzęta doświadczalne wykorzystywane do badania roli ER. w przypadku miażdżycy przez E2 myszy były samicami pozbawionymi apoE z ER lub bez. (AAee lub ee) na podłożu genetycznym C57BL6 / J. Jednakże, nietknięte kobiety oporne na ER (3 mają poziomy E2 w osoczu trzykrotnie wyższe niż myszy typu dzikiego w wyniku ich braku zależnego od ER. Funkcjonalnego mechanizmu negatywnej odpowiedzi (39), a także mają zwiększone poziomy testosteronu w osoczu, które hamują zmiana uszkodzenia w Apoe. /. myszy (8)
[więcej w: skoki spadochronowe łódź, rezonans magnetyczny otwarty warszawa, sympozjum diabetologiczne zakopane 2015 ]
[patrz też: polskie towarzystwo diabetologiczne, identyfikator uczestnika zjazdu, zjazd ptd 2015 ]