Prozapalny peptyd Helicobacter pylori aktywuje monocyty w celu wywołania dysfunkcji limfocytów i apoptozy ad 5

Figura 6Hp (2. 20) wyzwala apoptozę w komórkach NK i komórkach T. Monocyty i / lub limfocyty wzbogacone w komórki NK wytworzono jak opisano w legendzie do Figury 4. Po inkubacji komórki w bramce limfocytowej testowano pod kątem cech morfologicznych apoptozy (zmniejszone do przodu i zwiększone rozproszenie pod kątem prostym) za pomocą cytometrii przepływowej. . (a) Dane dotyczą częstotliwości apoptotycznego CD56 + (wypełnione kostki NK) lub CD3 (3 (T, otwarte słupki) po następujących terapiach: limfocyty inkubowane w pożywce hodowlanej (kontrola, ścieżka 1) limfocyty + 25% monocyty (ścieżka 2) ), limfocyty + 25% monocyty + Hp (2. 20) (50. M, linia 3), limfocyty + 50% monocyty (linia 4), limfocyty + 50% monocyty + Hp (2. 20) (linia 5). Wstawka pokazuje apoptozę indukowaną przez monocyty aktywowane przez Hp (2. 20) we wszystkich limfocytach, a te dane są średnie. SEM z trzech oddzielnych eksperymentów. Wyniki b przedstawiają apoptozę limfocytów indukowanych przez 25% monocytów (jasnoszare słupki) lub 50% monocytów (ciemnoszare słupki) aktywowanych za pomocą Hp (2. 20) w mieszaninach komórkowych traktowanych SOD + katalazą (kot) lub histaminą ( jego) (50 .M), samodzielnie lub w obecności antagonisty receptora H2 ranitydyna (ran) (50 .M). Aktywacja komórek T. Następnie określiliśmy ekspresję de novo antygenu CD69 wczesnej aktywacji (Leu-23) na komórkach T CD3 (3 + uzyskanych z frakcji limfocytów wzbogaconej w limfocyty T inkubowanej w obecności lub nieobecności monocytów aktywowanych przez Hp (2 ^ 20). Komórki T CD3 (3 traktowane IL-2 (100 U / ml) pod nieobecność monocytów nabyły CD69 na powierzchni komórki. Indukowana IL-2 (3 ekspresja CD69 była znacznie zmniejszona przez monocyty, a regulacja w dół CD69 była silnie wzmacniana przez Hp (2. 20) (Figura 7). Ponad 80% komórek NK nabyło CD69 po leczeniu IL-2 w nieobecności monocytów. IL-2 słabo indukowała CD69 na komórkach NK, gdy komórki te były inkubowane z monocytami, a hamowanie było skutecznie wzmacniane przez Hp (2. 20) (nie pokazano). Figura 7Hp (2. 20) uruchamia funkcjonalną inhibicję limfocytów T. Limfocyty wzbogacone w limfocyty T traktowano pożywką hodowlaną (kontrola) lub zmieszano z 25% lub 50% monocytami i Hp (2. 20) (50. M), jak wskazano. Wszystkie komórki były również leczone IL-2 (100 U / ml) podczas całonocnej inkubacji, a następnie analiza markera aktywacji CD69 w bramkowanych żywych (nieapoptotycznych) limfocytach CD3 (3 przy użyciu cytometrii przepływowej. Hp (2. 20) nie zmienia indukowanego IL-2. Pozyskiwania CD69 w komórkach T po inkubacji z limfocytami bez monocytów (nie pokazano). Mniej niż 3% komórek T CD3 (3 ekspresjonowało CD69 przed dodaniem IL-2 lub po inkubacji w pożywce hodowlanej przez noc (nie pokazano). Podobne wyniki uzyskano w trzech oddzielnych eksperymentach. MO, monocyty. Histamina hamuje wytwarzanie rodników indukowane przez Hp (2 . 20) 3 i przywraca funkcję limfocytów i ich żywotność Wpływ histaminy na aktywność NADPH-oksydazy. Wysokie stężenia histaminy normalnie obecne w błonie śluzowej żołądka (w przybliżeniu 10. 100. M, poz. 25, 26) doprowadziły nas do zbadania wpływu histaminy na indukowane przez Hp (2. 20). Tworzenie rodnika tlenowego w monocytach. Histamina znacząco hamowała powstawanie rodników tlenowych indukowane przez Hp (2. 20), a specyficzny antagonista receptora histaminowego H2 ranitydyna odwracał hamowanie (Figura 8a). Figura 8Hp (2. 20) indukowane wytwarzanie rodników tlenowych i jego hamowanie przez histaminę. Wytwarzanie anionów ponadtlenkowych w oczyszczonych monocytach badano za pomocą CL z amplifikacją izoluminolu. Komórki traktowano histaminą (50 .M) lub antagonistą receptora histaminowego H2 ranitydyną (50 .M). Dane pokazują średnie wartości. SEM z czterech oddzielnych eksperymentów. (b) Dane dotyczą cytotoksyczności komórek NK wobec komórek docelowych K562. Komórki przygotowano jak opisano w legendzie do figury 5 i traktowano Hp (2. 20) (50. M, wypełnione kółka), Hp (2. 20) + histaminę (50. M, wypełnione pudełka) lub Hp ( 2. 20) + histamina + ranitydyna (50. M, wypełnione pudełka). Wyniki wyrażono jako procent kontroli, przy czym 100% stanowi procent lizowanej komórki limfocytów kontrolnych bez dodanych monocytów i są one średnie. SEM z czterech oddzielnych eksperymentów. Wpływ histaminy na komórki NK i funkcje komórek T. Wcześniejsze badania pokazują, że histamina utrzymuje funkcje komórek NK i komórek T w obecności supresyjnych fagocytów poprzez hamowanie produkcji rodników tlenowych (14, 15). W związku z tym zbadaliśmy, czy komórki NK i komórki T chronione histaminą przed indukowaną monocytami supresją za pośrednictwem Hp (2. 20). Histamina zapobiegła następującym zdarzeniom wywołanym przez Hp (2. 20): regulacja w dół CD3. ekspresja w komórkach NK / komórkach T (Figura 5c), wyzwalanie apoptozy komórek NK i komórek T (Figura 6b) i hamowanie aktywności przeciwnowotworowej komórek NK (Figura 8b)
[podobne: identyfikator uczestnika zjazdu, ile kalorii ma chleb żytni, trening umiejętności społecznych scenariusz ]
[podobne: rozgrzewka przed ćwiczeniami, jogurt naturalny przepis, brak szczęścia w miłości ]