Podwójna mutacja w rodzinach z okresowym paraliżem definiuje nowe aspekty powolnej inaktywacji kanału sodowego ad 6

Z drugiej strony, krzywa inaktywacji szybkiej równowagi stacjonarnej została przesunięta do hiperpolaryzujących potencjałów w zmutowanych kanałach F1490L i wykazywała depolaryzujące przesunięcie w kanałach M1493I. Jednakże dwa pojedyncze mutanty najwyraźniej unieważniły wzajemne efekty w podwójnym mutancie, ponieważ krzywa szybkiej inaktywacji w stanie stacjonarnym dla podwójnego mutanta była prawie identyczna jak w przypadku kanałów WT. Nie zaobserwowano żadnego defektu w stałych czasowych dezaktywacji dla wszystkich badanych tu mutantów, wykluczając możliwość dezaktywacji kanałów w chorobie, jak wcześniej postulowano dla niektórych mutantów kanału PC Na + (21, 22). Nasi pacjenci wykazywali zmienną miotonię. Nie jest jasne, w jaki sposób rozwija się miotonia bez zmiany aktywacji, szybkiej inaktywacji lub dezaktywacji. Może to wynikać z ograniczeń naszego systemu ekspresyjnego. Zmienny charakter miotonii u naszych pacjentów sugeruje, że genetyka i czynniki środowiskowe przyczyniają się do ekspresji tej mutacji. Badanie pacjentów z biopsją mięśni in vitro może rzucić światło na mechanizm leżący u podłoża miotonii u pacjentów z podwójną mutacją w segmencie S5. Uważa się, że defekt w powolnej inaktywacji kanału jest ważnym czynnikiem w rozwoju i utrzymywaniu się paraliżu związanego z niektórymi chorobami kanału Na +, takimi jak HyperKPP (23). Cummins i Sigworth (13) wykazali, że powolna inaktywacja leży u podstaw HyperKPP w rT698M, homologie szczura najczęstszej mutacji ludzkiego HyperKPP (T704M), a ostatnio wykazaliśmy takie samo zachowanie w ludzkich kanałach T704M (8). Inne grupy zgłosiły przerwanie powolnej inaktywacji w niektórych innych mutacjach HyperKPP (14, 26). Gdy badano powolną inaktywację w naszych mutantach, F1490L i F1490L-M1493I wykazywały wzmocnienie powolnej inaktywacji, wykazaną przez przesunięcie hiperpolaryzujące w powolnej inaktywacji w stanie ustalonym (Figura 5). Jednak zmutowane kanały M1493I nieznacznie przesunęły powolną krzywą inaktywacji w kierunku depolaryzacji. Niedawno zgłosiliśmy mutację w segmencie S5 domeny IV, I1495F, która również powoduje HyperKPP (8). Co ciekawe, mutacja I1495F wzmacnia także powolną inaktywację kanału Na +. Jednakże, w przeciwieństwie do F1490L-M1493I, który najwyraźniej wpływa tylko na powolną inaktywację, I1495F zmienił szybką inaktywację i zależność od napięcia aktywacji, oprócz jej wpływu na powolną inaktywację. Nasze badania sugerują, że segment S5 domeny IV jest ważny w powolnej inaktywacji kanału Na +. Coexpression. podjednostka z p1 nie prowadziła do zmiany zachowania zmutowanego kanału mimo faktu, że pokazano, że A moduluje powolną inaktywację kanałów hSkM1 w oocytach (29). Jednakże A1 może modulować inne aspekty hSkM1, takie jak handel białkami. Jeśli podwójny mutant celuje w ten typ interakcji, zostałby pominięty w systemie ekspresyjnym HEK 293. Dodatkowo kinetyka kanału i zależności napięcia w komórkach HEK 293 mogą być inne niż te znalezione dla kanałów w natywnej tkance i w temperaturze fizjologicznej (30). W jaki sposób błędne interpretacje mutacji mogą spowodować paraliż tylko dzięki wzmocnieniu powolnej inaktywacji. W normalnych mięśniach można spodziewać się powolnej inaktywacji w depolaryzowanych komórkach, wyłączając długie depolaryzujące prądy Na + i repolaryzujące błony miocytów. Kiedy błona komórkowa jest depolaryzowana przez długi czas, zwiększona powolna inaktywacja prowadzi do utraty funkcji kanałów, aw konsekwencji do osłabienia, z którego odzyskuje się dużo czasu. W podwójnie zmutowanych kanałach powolna inaktywacja została wzmocniona i była bardziej kompletna. To wzmocnienie jest spowodowane szybszym rozwojem powolnej inaktywacji i wolniejszym powrotem po powolnej inaktywacji, co może skutkować dłuższym okresem refrakcji, który może prowadzić do paraliżu. Ostatnio Takahashi i Cannon (15) donoszą, że mutacja w segmencie S6 domeny I, która jest związana z miotonią, ale nie osłabienie, również zwiększa powolną inaktywację. Objawy HyperKPP u naszych pacjentów wykazały miotonię, co sugeruje, że zwiększenie powolnej inaktywacji nie jest wystarczające do zapobiegania miotonii u pacjentów z HyperKPP. Chociaż komórki HEK 293 były szeroko stosowane do badania mutacji kanałów Na + związanych z zaburzeniami miotonicznymi, kinetyka kanału i zależności napięcia w komórkach HEK 293 mogą wykazywać istotne różnice w porównaniu z kanałami znalezionymi w tkankach natywnych. Na przykład, chociaż punkt środkowy powolnej inaktywacji wynosi około. 65 mV dla kanałów WT SkM1 eksprymowanych w komórkach HEK 293 (to badanie i pozycje literatury 13, 14), wynosi około. 105 mV w mięśniu szkieletowym szczura (31, 32)
[podobne: chirurgia klatki piersiowej, identyfikator uczestnika zjazdu, rezonans magnetyczny otwarty warszawa ]
[patrz też: ninfomanka cda pl, chirurgia klatki piersiowej, ptd ]