Ludzkie fosfolambanowe null daje śmiercionośną rozszerzoną kardiomiopatię, która ujawnia zasadniczą różnicę między myszą a człowiekiem czesc 4

Badanie histopatologiczne obu eksplantowanych serc wykazało wyraźne zastąpienie zwłóknienia i rozszczepienie miofibrylarne (Figura 1c). Historia i badania fizyczne pozostałych członków rodziny nie wywoływały objawów niewydolności serca. Dodatkowa niespokrewniona osobnik heterozygotyczny została zidentyfikowana w kohorcie 76 pacjentów (III-13 na ryc. 2). Mężczyzna ten miał rozszerzoną kardiomiopatię w wieku 28 lat, z frakcją wyrzutową 20%, a jego heterozygotyczny brat (III-14 na ryc. 2) również miał rozszerzoną kardiomiopatię w wieku 27 lat z frakcją wyrzutową 25%. Ich ojciec zmarł również z powodu kardiomiopatii rozstrzeniowej w wieku 57 lat, a ich matka była homozygotyczna pod względem typu dzikiego. Chociaż DNA nie był dostępny do genotypowania ojca, wyniki te wskazują, że prawdopodobnie musiał on posiadać co najmniej jedną kopię zmutowanego genu (Figura 2). Co ciekawe, gdy dziewięć heterozygotycznych osobników z dwóch rodowodów (I-2, I-3, II-1, II-3, II-4, II-9 i III-5 na rysunku oraz III-7 i III- 10 na rycinie 2) przeszedł badanie echokardiograficzne, ich skurczowa funkcja lewej komory (frakcja wyrzutowa, 64,8%> 2,8%) była prawidłowa, ale cztery (I-3, II-1, II-3, III-7) wykazywały przerost lewej komory (169, 213, 293 i 313 g dla LVM w porównaniu z 127. 10 g dla normalnych, n = 7), co wskazuje na niepełną penetrację fenotypu kardiomiopatii (ryc. i 2). Figura 2 Analiza dziedziczenia mutacji T116G w pokrewnym II. Rodowód dla obecności lub nieobecności mutacji T116G w czterech pokoleniach. Dwóch braci (probantów III-13 i III-14), którzy byli heterozygotyczni pod względem mutacji L39stop prezentowanej z rozszerzoną kardiomiopatią. Ich zmarłemu ojcu, II-9, również zdiagnozowano rozdęta kardiomiopatię. Kwadraty reprezentują samców, a koła reprezentują samice. Linia oznacza, że pacjent nie żyje. Skutki funkcjonalne w zakresie -39 . na transport SR Ca2 +. Funkcję PLN-L39stop na transporcie SR Ca2 +, w porównaniu z dzikim typem PLN, zbadano przez koekspresję z SERCA2a (stosunek 1: 1) w komórkach HEK-293. Zmniejszenie widocznego powinowactwa SERCA2a do Ca2 + (KCa wyrażanego w jednostkach pCa) w mikrosomach izolowanych z transfekowanych komórek zapewniało miarę funkcji hamującej złotówki (21). Koekspresja ludzkiego dzikiego typu (PLN-WT) z SERCA2a spowodowała oczekiwane niższe powinowactwo pozorne dla Ca2 +, podczas gdy koekspresja SERCA2a z PLN-L39stop nie wywoływała efektów (Figura 3, czerwony). Opracowano również symulacje stanu heterozygotycznego, w którym dziki i zmutowany zł były koeksprymowane z SERCA2a. Ten sam spadek widocznego powinowactwa do Ca2 + obserwowano w. Heterozygotycznym. komórki jak w homozygotach typu dzikiego. komórki, co wskazuje, że mutant PLN-L39 nie wywiera dominująco-negatywnego wpływu na PLN-WT (rysunek 3, zielony). Figura 3 Wpływ mutanta typu dzikiego i homozygotycznego lub heterozygotycznego PLN-L39 na powinowactwo do Ca2 + SERCA2a. Komórki HEK-293 kotransfekowano z cDNA typu dzikiego, homozygotycznym lub heterozygotycznym zmutowanym PLN i cDNA SERCA2a i zmierzono poziomy wychwytu Ca2 +. Wyniki są reprezentatywne dla dwóch prawie identycznych i niezależnych eksperymentów. Vmax, maksymalna prędkość wychwytu Ca2 +. Skutki funkcjonalne w zakresie -39 . na mechaniki miocytów i cyklu Ca2 +. Zbadano wpływ złomu-L39 na kurczliwość miocytów i homeostazę Ca2 + w izolowanych dorosłych szczurzych miocytach zakażonych wektorami adenowirusowymi zawierającymi cDNA typu dzikiego lub L39stop. Figura 4 (a i b) przedstawia reprezentatywne zapisy długości komórki i wartości przejściowych Ca2 + w kardiomiocytach szczura. Zgodnie z oczekiwaniami, infekcja dzikim typem złota zmniejszyła stopień skracania komórek i szybkości skracania / skurczenia (+ dL / dt) i relegmentacji / relaksu (. DL / dt), z równoległymi zmianami w cyklu Ca2 +, w porównaniu z kontrolą komórki zakażone adenowirusem eksprymującym GFP (Figura 4c). Natomiast infekcja adenowirusem w zakresie L39stop nie zmieniała mechaniki miocytów ani cyklu Ca2 + (ryc. 4, c i d). Ryc. 4 Wpływ mutacji PLN-L39stop na mechanizmy miocytów sercowych szczura dorosłych i kinetykę Ca2 +. Pokazano reprezentatywne zapisy skrótu komórkowego (a) i przejściowego Ca2 + (b) w kardiomiocytach izolowanych z dorosłych serc szczurów zakażonych Ad.GFP, Ad.PLN-WT i Ad.PLN-L39stop. Miocyty stymulowano przy 0,5 Hz w 25 ° C. (c) Procent frakcji skracania miocytu (FS%), szybkość skurczu (+ dL / dt) i szybkość relaksacji (. dL / dt). (d) przejściowa amplituda Ca2 + (stosunek 340/380 nm) i czas do 50% zaniku sygnału Ca2 + (T50). Z każdego z trzech pojedynczych preparatów badano co najmniej 16. 20 komórek
[przypisy: rezonans magnetyczny otwarty warszawa, młody jęczmień a odchudzanie forum, polskie towarzystwo diabetologiczne ]
[więcej w: jogurt naturalny przepis, ninfomanka cda pl, chirurgia klatki piersiowej ]