Kluczowa rola dla komórek dendrytycznych plazmacytoidów w ochronie antywirusowej przez mikrobicyd pochwowy CpG ODNa na bazie pochwy cd

Wyniki te ujawniły, że limfocyty T CD4 + lub komórki T CD8 + przyczyniają się w minimalnym stopniu do ochrony przed opryszczką narządów płciowych (Figura 3). Podczas gdy nastąpił niewielki wzrost miana wirusa i patologii u myszy zubożonych w komórki NK po dostarczeniu mikrobicydu CpG ODN, większość myszy zubożonych w NK była nadal chroniona przed prowokacją wirusową (Figura 3A). Wszystkie te protokoły deprecjacji spowodowały ponad 90% wyczerpania docelowego podzbioru komórek (Suplementalna Figura 2). Figura 3 Populacje limfocytów nie są wymagane do ochrony pośredniczonej CpG ODNy przeciwko prowokacji HSV-2 narządów płciowych. Myszy traktowano przeciwciałami powodującymi zubożenie limfocytów T CD4 +, komórek T CD8 + lub komórek NK przed inokulacją CpG ODN i podczas trwania eksperymentu. (A) Wskaźniki przeżywalności, (B) średnią ocenę patologii narządów płciowych i miana (C) wirusa w płukankach pochwy myszy monitorowano po inokulacji CpG ODN ivag i prowokacji HSV-2 (104 PFU). Wartości reprezentują średnią. SEM (n = 5 / grupa). Dane są reprezentatywne dla 3 niezależnych eksperymentów. Wykluczając rolę tych limfocytów w krytycznym zapewnieniu wrodzonej ochrony za pośrednictwem CpG ODN ., skupiliśmy się na roli pDC. PDC wyrażają TLR9 i odpowiadają na ODN CpG i są silnymi sekretami IFN antywirusowych cytokin typu I (12, 13). Najpierw zbadaliśmy obecność pDC w błonie śluzowej pochwy przed i po leczeniu CpG ODN. PDC wykryto w niewielkiej liczbie w błonie śluzowej pochwy w stanie stacjonarnym i szybko rekrutowano po dostarczeniu ODN CgG ivag (Figura 4). Następnie, w celu zbadania znaczenia pDCs w kontekście mikrobicydów opartych na CpG ODNy, myszy pozbawiono pDC przez Abs przed i po inokulacji ODN CpG, a myszy te poddano prowokacji letalną dawką HSV-2. Myszy zubożone w pDC były wyjątkowo podatne na infekcję wirusową i chorobę (Figura 5). Te myszy miały wysokie miano wirusa w pochwie, nawet bardziej niż myszy WT, które nie były leczone ODN CpG (Figura 5C), co sugeruje, że pDC obecne u myszy WT są zdolne do ograniczenia replikacji wirusa nawet w przypadku braku primingu CpG ODN. Ponadto myszy zubożone w pDC cierpiały na chorobę prawie porównywalną do tej u myszy WT traktowanych ODN bez CpG (Figura 5B). W konsekwencji większość myszy zubożonych w pDC uległa śmierci (Figura 5A), chociaż z opóźnioną kinetyką w porównaniu z chimerycznymi myszami TLR9a / CHT (Figura 2A). Fakt, że niektóre myszy pozbawione pDC przeżyły, może odzwierciedlać niepełne zubożenie pDC (> 90% ubytku, Suplementowa Figura 2) lub wskazać, że hematopoetyczny typ komórek bez pDC przyczynia się do resztkowej ochrony przed infekcją wirusową. Figura 4pDC są rekrutowane do błony śluzowej pochwy 24 godziny po traktowaniu ODN CpG. Zawiesiny pojedynczych komórek tkanki pochwy przygotowano i wybarwiono przeciwciałem anty-mPDCA-1, a żywe komórki bramkowano przez wykluczenie 7-AAD i analizowano za pomocą cytometrii przepływowej. Cieniowany obszar wskazuje kontrolne izotypowe oznaczanie Ab komórek izolowanych z myszy traktowanych CpG ODNa; czarna linia wskazuje komórki pochwy od myszy traktowanych PBS i barwionych anty-mPDCA-1; a szara linia wskazuje komórki pochwy od myszy traktowanych CpG ODN 24 godziny wcześniej. Dane są reprezentatywne dla 4 niezależnych eksperymentów. Fig. 5pDC ma kluczowe znaczenie w pośredniczonej przez CpG ODN. Ochronie przed prowokacją HSV-2 narządów płciowych. Myszy WT leczono kontrolną anty-mPDCA-1 lub izotypem w dniu dnia i dniu traktowania CpG ODN i prowokowano dożylnie 104 PFU HSV-2 24 godziny po inokulacji CpG ODN. (A) Wskaźniki przeżywalności, (B) średnią ocen patologii narządów płciowych i miana wirusa (C) w płukankach pochwy myszy monitorowano. Wartości reprezentują średnią. SEM (n = 5 / grupa). Wyniki są reprezentatywne dla 2 oddzielnych eksperymentów. * P <0,05 między grupami traktowanymi PBS (puste kwadraty) i pozbawionymi pDC, poddanymi obróbce CpG ODNy (otwarte trójkąty). Znaczenie IFN typu I w CpG ODNa indukowało stan antywirusowy. pDC reprezentują najsilniejsze sekrety IFN typu I w odpowiedzi na różnorodne wirusowe i syntetyczne bodźce, w tym CpG ODN (12, 13). IFN typu I są najlepiej scharakteryzowanymi cytokinami antywirusowymi zdolnymi do hamowania replikacji większości wirusów (14, 15). Nasze dane dotyczące zapotrzebowania na pDC w ochronie oferowanej przez mikrobicyd CpG ODN . sugerują znaczenie IFN typu I. Aby zbadać tę możliwość, myszy z niedoborem IFN- receptor (IFN-aR) zaszczepiono dopochwowo CpG ODN i, 24 godziny później, prowokowano letalną dawką HSV-2. Ta analiza wykazała, że ODN CpG całkowicie nie zapewnia ochrony przed prowokacją HSV-2 w IFN. R. /. myszy (ryc. 6) [przypisy: polskie towarzystwo diabetologiczne, gimnastyka korekcyjna zestaw ćwiczeń, ile kalorii ma chleb żytni ] [hasła pokrewne: rozgrzewka przed ćwiczeniami, jogurt naturalny przepis, brak szczęścia w miłości ]