Kluczowa rola dla komórek dendrytycznych plazmacytoidów w ochronie antywirusowej przez mikrobicyd pochwowy CpG ODNa na bazie pochwy ad

Pokazujemy, że zubożenie poszczególnych podzbiorów limfocytów (komórek CD4, CD8 lub NK) przed leczeniem CpG ODN nie wpływa na ochronę. Na koniec, wykazujemy, że plazmocytoidowe DC (pDC) są rekrutowane do miejsca inokulacji CpG ODN i odgrywają one kluczową rolę w ochronie za pośrednictwem CpG ODN .. Wyniki te sugerują, że pDC można wykorzystać do nadania ogólnego stanu odporności przeciwwirusowej odporności wrodzonej przeciwko różnym chorobom przenoszonym drogą płciową w obrębie błony śluzowej narządów płciowych. Wyniki TLR9 i MyD88 są wymagane do ochrony antywirusowej nadawanej przez pochwowy CpG ODN. Aby zbadać znaczenie sygnalizacji TLR9 w ochronie antywirusowej przez ODN CpG, myszy z niedoborem TLR9 lub MyD88 zaszczepiono ivag ODCD CpG i, 24 godziny później, prowokowano śmiertelną dawką (104 PFU) HSV-2. Zgodnie z oczekiwaniami, zarówno TLR9, jak i obligatoryjny adapter MyD88 (11) były wymagane do nadania ochrony po inokulacji CpG ODN (Figura 1). Tak więc, TLR9. /. i MyD88. /. myszy nie kontrolowały miejscowej replikacji wirusa (Figura 1C), konsekwentnie rozwijając szybką patologię (Figura 1B) i ulegając śmierci (Figura 1A). Jak podano wcześniej (5-7), myszy WT były całkowicie chronione przed prowokacją przez wstępne potraktowanie ODN CpG. Dane te dostarczyły nam podstawy do zbadania znaczenia różnych typów komórek w nadawaniu wrodzonej ochrony przed HSV-2 wywołanej CpG ODNa. Figura 1Wytrzymałość TLR9 i MyD88 dla pośredniczonej CpG ODN. Z prowokacji HSV-2 narządów płciowych. (A) Wskaźniki przeżywalności, (B) średnie oceny patologiczne narządów płciowych i miana (C) wirusa w płukankach pochwy myszy zaszczepionych ivag PBS lub CpG ODN 24 godziny przed prowokacją 104 PFU HSV-2. Powyższe parametry badano codziennie po zakażeniu. Wartości reprezentują średnią. SEM (n = 5 / grupa). Dane reprezentują 2 powtarzane eksperymenty. Ochrona antywirusowa wymaga zarówno odpowiedzi komórek hematopoetycznych jak i zrębowych na ODN CpG. Wiadomo, że komórki znajdujące się w warstwie nabłonka pochwy eksprymują TLR9 (3, 4). Ponadto, w oczyszczonych keratynocytach pochwy, TLR9 wyrażano na niskim poziomie, który był regulowany w górę przy stymulacji ODN CpG (Suplementowa Figura 1, materiał uzupełniający dostępny online z tym artykułem; doi: 10,1172 / JCI28681DS1). W celu wyjaśnienia typów komórek zaangażowanych w wrodzoną ochronę za pośrednictwem CpG ODNa przeciwko HSV-2, wytworzono 2 zestawy chimerycznych myszy indukowanych napromieniowaniem BM. Aby zbadać znaczenie rozpoznawania ODN CpG przez komórki hematopoetyczne w zapewnieniu ochrony, BM z TLR9. /. myszy użyto do odtworzenia napromieniowanych myszy WT (TLR9a / WT). Po dostarczeniu dopochwowo CpG ODN myszy te uległy infekcji wirusowej i śmierci, z podobną kinetyką obserwowaną w TLR9a /. myszy (Figura 2). Wyniki te wskazują, że komórki krwiotwórcze muszą reagować poprzez ich TLR9 w celu zapewnienia ochrony antywirusowej przed HSV-2 po działaniu bakteriobójczym CpG ODN. Następnie zbadano rolę rozpoznawania CpG ODN przez radioreceptorowe komórki zrębowe przez generowanie WT . TLR9a / P chimera. Co interesujące, myszy te uległy również indukcji HSV-2, aczkolwiek z opóźnioną kinetyką w porównaniu z chimerycznymi myszami TLR9a / / WT (Figura 2), co wskazuje, że odpowiedź komórek zrębu na TLR9 jest ważna w aktywności mikrobójczej CpG ODN. Opóźnienie to korelowało ze zmniejszonymi mianami wirusów stwierdzonymi w dniach 2 i 3 po infekcji w płucach pochwy WT . TLR9a / r. chimera w porównaniu z chimerycznymi myszami TLR9a / CHT (P <0,05, Figura 2C). Tak więc, wyniki te wskazują, że zarówno komórki hematopoetyczne jak i zrębowe muszą reagować na ODN CpG w celu nadania ochrony antywirusowej przed prowokacją HSV-2 i że efekt był bardziej znaczący, gdy komórki krwiotwórcze. reakcja na CpG ODN uległa ablacji w porównaniu z reakcją komórek zrębu. Figura 2 Rozpoznanie ODN CpG przez TLR9 przez komórki krwiotwórcze i zrębowe jest wymagane do ochrony przed prowokacją HSV-2 narządów płciowych. WT (n = 5), TLR9a / WT (n = 6) i WTyTLR9a /. (n = 3) chimeryczne myszy zaszczepiono ivag PBS lub CpG ODN 24 godziny przed prowokacją 104 PFU HSV-2. (A) Wskaźniki przeżywalności, (B) średnią ocen patologii narządów płciowych i miana wirusa (C) w płukankach pochwy myszy monitorowano. Wartości reprezentują średnią. SEM. Wyniki są reprezentatywne dla 3 niezależnych eksperymentów. * P <0,05 między TLR9a / WT i WT. TLR9. /. grupy. pDCs są wymagane dla ochrony ODp CpG przed HSV-2. Wiadomo, że różne typy komórek linii limfoidalnej i mieloidalnej są rekrutowane do błony śluzowej pochwy po inokulacji CpG ODN (5). Aby zidentyfikować typ komórek krwiotwórczych odpowiedzialnych za ochronę za pośrednictwem CpG ODN ., różne podzbiory komórek wrodzonego i adaptacyjnego układu odpornościowego zostały zubożone przed i po traktowaniu CpG ODN i prowokacji HSV-2. [przypisy: jogurt naturalny przepis, koktajl z natki pietruszki, trening umiejętności społecznych scenariusz ] [hasła pokrewne: ile kalorii ma chleb żytni, gimnastyka korekcyjna zestaw ćwiczeń, skoki spadochronowe łódź ]